THE EFFECT OF AMITRIPTYLINE HYDROCHLORIDE ON ISOLATED FROG HEART

Full Text

Введение

Поступление питательных веществ и кислорода к тканям и клеткам животных, а также выведение конечных продуктов метаболизма обеспечивается кровью, которая циркулирует по замкнутой сердечно-сосудистой системе [1].

В последнее время возрастает количество случаев негативного влияния гидрохлорида амитриптилина на сердечно-сосудистую систему. Данный препарат применяется для лечения депрессий с признаками меланхолии и склонности к формированию депрессивного бреда, что отличает его от большого количество других антидепрессантов [2].

Кардиотоксическое действие амитриптилина гидрохлорида изучалось только на изолированном сердце теплокровных животных. Определенный интерес представляет изучение действия амитриптилина гидрохлорида на изолированное сердце холоднокровного животного (лягушки)

Методы исследования

Было поставлено 6 экспериментов на препаратах изолированного по Штраубу сердца лягушки. В работе исследовано влияние на функциональное состояние сердца растворов амитриптилина гидрохлорида различных концентраций.

Для более точного определения частоты сердечных сокращений методика была модифицирована, а именно использовалась канюля с градуировкой.  

Визуально определяя подъем столба жидкости во время систолы, можно было довольно точно узнать значение ударного объема сердца.

В качестве исходного раствора в эксперименте использовали раствор Рингера следующего состава (в г/л): NaCl – 6,5; KCl – 0,2; CaCl – 0,2; NaHCO₃ – 0,1.

 

В эксперименте был использован раствор амитриптилина в следующих концентрациях: 10^-8 М, 10^-6 М, 10^-4 М.

Для установления зависимости сердечного выброса от величины пост-нагрузки и проявления закона Франка-Старлинга градуированная канюля последовательно заполнялась следующими объемами исследуемых растворов: 54 мкл, 108 мкл, 162 мкл, 216 мкл, 270 мкл, 324 мкл, 378 мкл (0, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35 делений шкалы соответственно).

Статистическая обработка

Для статистической обработки и построения графиков использовался программный пакет SigmaPlot 12.5 с использованием однофакторного дисперсионного анализа (ANOVA).

Все данные представлены как средние значения ± стандартные ошибки.

Статистически значимыми считались изменения со значениями р≤0,05.

Результаты исследования

В результате проведенных исследований было установлено, что амитриптилин гидрохлорид оказывает выраженное влияние на функциональное состояние сердца.

Препарат вызывал уменьшение ударного объёма, частоты сердечных сокращений и, как следствие, минутного объёма сердца.

На рис. 1. показано, что хронотропный эффект имел отрицательный характер. Достоверные изменения были выявлены при всех концентрациях препарата.

При использовании раствора амитриптилина гидрохлорида в концентрации 10^-8 М статистически значимые изменения наблюдались при постнагрузках 162 мкл, 270 мкл, 378 мкл и составили соответственно 17,7±9,3% (р<0,05), 24,1±8,4% (р<0,05), 23,3±9,2 (р<0,05).

Рис.1. Изменение частоты сердечных сокращений при перфузии раствором амитриптилина гидрохлорида изолированного сердца лягушки (в % относительно контроля) * – р<0,05

При концентрации раствора 10^-6 М значимые изменения наблюдались при постнагрузках 0 мкл, 108 мкл, 162 мкл, 216 мкл и составили соответственно 20±7,5% (р<0,05), 30,4±12,1% (р<0,05), 29,5±11,3% (р<0,05) и 34,8±14,1% (р<0,05).

При концентрации раствора 10^-4 М статистически значимые изменения наблюдались при постнагрузках 108 мкл, 216 мкл, 270 мкл, 378 мкл и составили соответственно 42,5±13,5% (р<0,05), 47,6±17,4% (р<0,05), 40,2±14,8 (р<0,05), 53±21,1% (р<0,05).

Как видно из рис. 2, в экспериментах наблюдалось уменьшение ударного объема изолированного сердца лягушки.

 

Рис. 2. Изменение ударного объема при перфузии раствором амитриптилина гидрохлорида изолированного сердца лягушки (в % относительно контроля) *р<0,05

При использовании раствора амитриптилина гидрохлорида в концентрации 10^-8 М статистически значимые изменения наблюдались при постнагрузках 108 мкл, 324 мкл и составили соответственно 11,2±3,6% (р<0,05), 7,6±3,2% (р<0,05).

При концентрации раствора 10^-6 М значимые изменения наблюдались при постнагрузках 108 мкл, 162 мкл и 270 мкл. Отклонения составили соответственно 13,6±5,4% (р<0,05), 12,9±5,7% (р<0,05) и 19,1±8,4% (р<0,05).

При использовании раствора амитриптилина гидрохлорида в концентрации 10^-4 М значимые изменения наблюдались при постнагрузках 216 мкл, 270 мкл, 324 мкл, 378 мкл и составили соответственно 22,6±7,4% (р<0,05), 24,5±9,2% (р<0,05), 20,8±7,6 (р<0,05) и 23,3±9,1% (р<0,05).

Изменение величины минутного объема сердца представляет собой совокупность изменений ударного объема и частоты сердечных сокращений.

         На рис. 3. показано, что происходит уменьшение минутного объема сердца. Статистически значимые изменения были выявлены для всех концентраций исследуемого соединения.

При концентрации раствора амитриптилина гидрохлорида 10^-8 М при постнагрузке 108 мкл изменение составило 28,6±10,2% (р<0,05), при постнагрузке 216 мкл изменение составило 19,8±5,2% (р<0,05), а при постнагрузке 378 мкл  –32,6±11,7% (р<0,05).

При концентрации исследуемого раствора 10^-6 М статистически значимые отклонения наблюдались при постнагрузках 162 мкл, 324 мкл, 378 мкл и составили 38,2±11,8% (р<0,05), 43,2±15,2% (р<0,05) и 38,9±10,1% (р<0,05) соответственно.

Статистически значимые отклонения при концентрации амитриптилина гидрохлорида 10^-4 М наблюдались при постнагрузках 216 мкл, 270 мкл и 378 мкл и составили соответственно 59,8±18,7% (р<0,05), 62,6±22,4% (р<0,05) и 64,3±25,1% (р<0,05).

Рис. 3. - Изменение минутного объёма при действии амитриптилина гидрохлорида изолированное сердце лягушки при различных объемах заполнения градуированной канюли (в % относительно контроля) *– р<0,05

На гистограммах, где показаны изменения в абсолютных величинах видно, что закон Франка – Старлинга соблюдался во всех случаях: чем больше величина постнагрузки во время диастолы, тем сильнее сокращение миокарда в последующую систолу. Это хорошо видно по изменениям ударного объема (рис. 4).

Рис. 4. - Изменение ударного объема при перфузии раствором амитриптилина гидрохлорида на изолированное сердце лягушки при различных объемах заполнения градуированной канюли *– р<0,05.

Обсуждение результатов

Наиболее выраженный отрицательный хронотропный и инотропный эффект отмечается при исследовании раствора амитриптилина гидрохлорида в концентрации 10^-4 М.

Полученные нами результаты в определённой мере согласуются с данными других авторов. Г. В. Чекмарев и В. Т. Долгих в опытах на изолированном сердце крыс показали, что при действии амитриптилина гидрохлорида на сердце отмечается уменьшение сократительной функции миокарда в период стабилизации, которое усугубляется при стимулировании миокарда ритмом высокой частоты. При этом отмечается снижение скоростных и силовых характеристик сократимости и постепенное увеличение диастолического давления в левом желудочке [3].

В исследованиях  F. Nielsen-Kudsk и S. Quist было показано, что перфузия амитриптилином приводила к уменьшению частоты спонтанных биений, выраженному снижению амплитуды и частоты сокращений сердца. Этот эффект увеличивался при воздействии более высокой концентрации амитриптилина гидрохлорида [4].

К одному из механизмов кардиотоксического действия амитриптилина гидрохлорида относится «повреждение  мембранных насосов, в первую очередь, зависимой АТФазы сарколеммы и саркоплазматического ретикулума» [3, с. 27]. Кроме того, данное соединение увеличивает анаэробный гликолиз в кардиомиоцитах и нарушает механизмы транспорта энергии в кардиомиоцитах в результате снижения активности некоторых ферментов креатинкиназного челночного механизма [5].

Гидрохлорид амитриптилина приводит к фрагментации и снижению потенциала митохондриальной мембраны [6].

В результате блокады гидрохлоридом амитриптилина натриевых каналов миокарда увеличивается продолжительность потенциала действия сердца и абсолютной рефрактерности. Кроме того, может происходить снижение скорости проводимости в миокарде [7, 8].

  Гидрохлорид амитриптилина подавляет быстрый калиевый ток задержанного выпрямления (Kr) [9]. Это приводит к деполяризации мембраны, генерации дополнительных ПД, удлинению QT интервала [10].

Требуется дальнейшее изучение действия амитриптилина гидрохлорида на деятельность сердечно-сосудистой системы.

Заключение

Амитриптилина гидрохлорид оказывает отрицательное хронотропное и инотропное влияние на препарат изолированного сердца лягушки. Эффективная концентрация амитриптилина гидрохлорида, при которой отмечалось максимальное изменение исследуемых параметров сердечной деятельности, а именно частоты сердечных сокращений, ударного объема и минутного объема сердца, составила 10^-4 М.

About the authors

Ilya Aleksandrovich Shubnyakov

Samara University

Author for correspondence.
Email: ilyashyb@gmail.com

Undergraduate student of the Biological Faculty

Russian Federation, 443086, Russia, Samara, Moskovskoye Shosse, 34.

Ruslan Anasovich Zainulin

Samara University

Email: zajnulin63@inbox.ru

associate professor of the Department of Human and Animal Physiology

Russian Federation, 443086, Russia, Samara, Moskovskoye Shosse, 34.

Irina Dmitrievna Romanova

Samara University

Email: romanova_id@mail.ru

associate professor of the Department of Human and Animal Physiology

Russian Federation, 443086, Russia, Samara, Moskovskoye Shosse, 34.

References

Supplementary files